안녕하세요 윤채미 프로토콜 천사입니다.
오늘 소개드린 부분은 지방 유래 줄기세포를 분리해서 연골로 분화시키는 프로토콜을 소개드립니다.
Protocol 바로가기: nature.com/articles/nprot.2010.81https://star-protocols.cell.com/protocols/2935#bib1
The ability to isolate, expand and differentiate adult stem cells into a chondrogenic lineage is an important step in the development of tissue engineering approaches for cartilage repair or regeneration for the treatment of joint injury or osteoarthritis, as well as for their application in plastic or reconstructive surgery. Adipose-derived stem cells (ASCs) provide an abundant and easily accessible source of adult stem cells for use in such regenerative approaches. This protocol first describes the isolation of ASCs from liposuction aspirate. The cell culture conditions provided for ASC expansion provide a large number of multipotent stem cells. Instructions for growth factor–based induction of ASCs into chondrocyte-like cells using either cell pellet or alginate bead systems are detailed. These methods are similar to those published for chondrogenesis of bone marrow–derived mesenchymal stem cells but distinct because of the unique nature of ASCs. Investigators can expect consistent differentiation of ASCs, allowing for slight variation as a result of donor and serum lot effects. Approximately 10–12 weeks are needed for the entire process of ASC isolation, including the characterization of chondrocyte-like cells, which is also described.
For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Bradley et al. (2010)
성체 줄기 세포를 분리, 확장 및 연골 줄기세포로 분화시키는 능력은 관절 손상 또는 골관절염 치료를 위한 연골 복원을 위한 조직 공학 접근법 개발에 있어서 중요한 단계입니다. 또한 성형 또는 재건 수술에도 적용될 수 있습니다. 지방 유래 줄기 세포(ASCs)는 풍부하고 쉽게 접근 가능한 원천을 제공합니다. 이 프로토콜은 먼저 지방흡입물로부터 ASCs의 분리를 설명합니다. ASC 확장을 위한 세포 배양 조건은 다분화 가능한 많은 수의 줄기 세포를 제공합니다. 세포 pellet 또는 alginate beed 시스템을 사용하여 ASC를 연골세포와 유사한 세포로 유도하기 위한 성장 인자 기반의 지침이 상세히 제공됩니다. 이러한 방법들은 골수 유래 골격 줄기 세포의 연골형성에 대한 출판 논문과 유사하지만 ASC의 특이성 때문에 차이가 있습니다. 연구자들은 기부자 및 serum lot의 영향으로 약간의 변동성이 허용되는 ASC의 일관된 분화를 기대할 수 있습니다. ASC 분리 및 연골세포와 유사한 세포의 특성화를 포함한 전체 과정에는 약 10-12주가 소요되며, 이러한 과정도 설명되어 있습니다.
이 프로토콜을 통해 지방 유래 줄기세포로 부터 연골 분화 과정을 확인해 볼 수 있습니다.
